中药及中药复方是一个复杂系统,中药药效物质是中医药发挥临床治疗作用的基础,中药药效筛选和评价方面的新技术新方法引进已成为学术界关注的问题?斑马鱼作为新型模式动物的优势正在逐渐被人们所认识?应用的领域也越来越宽广?其在中药药效筛选和评价中的应用日见广泛?并逐步扩展至毒性评价?药物代谢等多个方面?本文介绍了近年国内外斑马鱼模型在中医药研究中的应用概况,以期有利于中医药基础研究?

中药药性是中药有别于现代药物的根本属性,是药物与疗效有关的各种属性和性质?中药药性理论肇始于四气五味,经过几千年不同历史时期的补充完善,形成了目前以四气?五味?归经?升降沉浮?有毒无毒为主体的中药药性理论?由于阴阳五行哲学思维的渗透和不同历史时期格物传统的差异,中药药性理论的形成具有复杂性特征,表现在以下几个方面?第一,药性确定的途径具有多源性,除了药效反推法,还有以药材质地?颜色?生长环境?加工处理等自然属性为依据的取象比类法,并受到易家?道家?巫家思想等的影响;第二,就药效反推法来看,药性与功效之间的多选性普遍存在,同一药性可以通过不同的功效反推得到?因此,中药药性形成具有多源性特征,药性实质研究应密切关注特定药物的认知起源及相对应的功效特点?

随着复杂网络理论研究的进展,对于复杂系统的认识和探索方法已经发生了革命性的变化?基于网络的方法应用在生物医学研究中,产生了网络生物学和网络药理学?心血管系统可以抽象为一个复杂网络,而心血管疾病则可以看作网络结构和功能的损伤所致?中医药治疗心血管疾病确有良好的临床疗效,而其相关机制至今仍未阐明?笔者提出在复杂网络理论?网络生物学和网络药理学指导下,应用网络的方法来研究中医药防治心血管疾病的机制,从而产生一门新的学科——中医药网络心血管病学?本文简单介绍了复杂网络理论?网络生物学和网络药理学,从网络的角度阐发了“病-证-方-药”相关的实质?将网络生物学用于分析心血管疾病和证候,网络药理学用于分析复方和中药,这种基于“网络-网络”的研究方法可以为阐明中医药机制提供新的视角?

背景:慢性重型肝炎是一种病情危重?病死率高的疾病,目前尚缺乏特效的药物和治疗手段,临床主要采用综合对症支持?人工肝和肝移植治疗?中药多途径联合西医治疗慢性重型肝炎的研究已有大量报道,但对其疗效和安全性尚缺乏系统的评价?

目的:评价中西医结合治疗慢性重型肝炎的有效性和安全性?

检索策略:检索PubMed?Cochrane图书馆?中国知网数据库?重庆维普中文科技期刊数据库?中国生物医学文献数据库网络版和万方数据?所有数据库检索时间均从建库截止至2012年2月29日?

纳入标准:纳入比较中药联合西医综合治疗或人工肝血浆置换治疗慢性重型肝炎与西医疗法的随机对照试验?

资料提取与分析:由两名研究者独立提取资料,采用Cochrane协作网提供的软件RevMan 5.1进行资料分析?结局的效应指标为相对危险度或均数差,均以效应值和95%置信区间表示?

结果:共纳入45项随机对照试验,涉及4 449例慢性重型肝炎患者,文献质量普遍偏低?在总有效率及降低病死率方面,口服中药?中药灌肠?中医综合治疗联合西医综合治疗或血浆置换均优于单纯西医治疗,差异具有统计学意义?在实验室指标方面,中西医结合治疗降低总胆红素和丙氨酸氨基转移酶?改善凝血功能的疗效优于西医对照组,降低天冬氨酸氨基转移酶活性方面两者未见显著差异;中药口服联合西医综合治疗或血浆置换在促进白蛋白合成?改善低蛋白血症方面优于单纯西医治疗;而中药灌肠对血浆白蛋白水平无显著影响?试验组的不良反应主要表现为灌肠后腹痛?腹泻等肠道症状,而对照组主要表现在血浆置换引起的不良反应?

结论:中西医结合治疗慢性重型肝炎具有促进肝功能和凝血功能恢复?降低病死率的作用?但是由于中文发表的临床试验质量较低,中西医结合治疗慢性重型肝炎的优效性尚缺乏有力的证据?今后仍然需要按照国际标准,开展设计严谨?实施规范的多中心?大样本随机对照试验,进一步验证中药制剂的疗效?

无法考察交互作用的三因素设计包括交叉设计和拉丁方设计两种?这两种设计类型较为特殊,所考察的三个因素包括一个实验因素和两个区组因素?尽管这两种设计在实际研究中运用的频率不是很高,但若在合适的场合正确运用这两种设计类型,将取得很好的实验效果?本文结合实例,介绍3×3交叉设计和拉丁方设计?

目的:本研究探讨物理治疗师发生职业倦怠的普遍性,了解气功疗法是否可以有效地缓解这类情况,并为今后更深入的研究提供初步的数据?

方法:物理治疗师们在试验前先完成一份人口调查问卷以及职业倦怠问卷,然后选择那些在最重要的量表维度中显示职业倦怠水平最高的物理治疗师分为干预组和对照组?8个干预组成员需完成一个由海德堡中医学院研发的特定的气功介入,另外8个对照组成员则被排在等待名单中?在为期3周的治疗或等待后,再一次对两组人员进行职业倦怠问卷调查,并比较前后两次的结果?

结果:对106个物理治疗师(36名男性,70名女性)的职业倦怠问卷结果显示,52人(49%)存在情绪疲劳,36人(33.9%)存在自我感觉丧失,33人(31.2%)成就感降低,而在这33人中有4人(3.8%)存在严重的工作倦怠情绪,29人(27.4%)则处于中等程度倦怠?气功治疗干预组的情绪疲劳分量表的平均值从38.0下降到31.4,而对照组的均值从33.9上升到37.9,两组数据差异具有统计学意义(P=0.023)?气功治疗使自我感觉丧失分量表的平均值从10.8降低到6.8,而在对照组中则从7.3上升到10.6,干预组与对照组之间的差异同样具有统计学意义(P=0.013)?关于成就感的分量表,两组数据之间的差异不明显?

结论:气功可以有效改善职业倦怠的症状,此类气功是自我控制工作倦怠感的有效途径?每天仅需2次,每次5 min的练习就能取得一定的效果?本次试验的结果也为今后进行更大范围的盲法?对照?随访试验设计奠定了基础?

背景:血管性痴呆是继阿尔茨海默病后的第二大常见痴呆类型?随着人口的老龄化,其患病率逐步上升?但目前尚无证实有效的药物,因此寻求中医治疗是非常必要的?瘀阻脑络证是血管性痴呆的主要中医证候?

目的:观察活血化瘀中药治疗轻中度血管性痴呆的临床疗效及安全性?

设计?场所?对象和干预措施:这是一项随机?双盲?安慰剂平行对照临床试验?自2009年3月至2010年12月共纳入48例轻中度血管性痴呆患者,随机分为活血化瘀中药组(n=24)和安慰剂对照组(n=24),所有患者接受2周的洗脱期,其后分别接受为期12周的活血化瘀中药治疗或安慰剂?安慰剂气味和外观均与活血化瘀中药相同?

主要结局指标:主要疗效指标是阿尔茨海默病评估量表(认知部分)(Alzheimer’s Disease Assessment Scale-cognitive subscale, ADAS-cog);次要疗效指标是简易精神状态检查量表(Mini-Mental State Examination, MMSE)和日常生活能力量表(Activities of Daily Living, ADL)?

结果:基线时两组人口学及神经心理学量表得分均无差异?活血化瘀中药组治疗12周后ADAS-cog得分较基线无显著变化(P>0.05),安慰剂组12周后ADAS-cog得分较基线显著升高2.35分,两组间ADAS-cog变化值的差异具有统计学意义(P=0.027)?两组间MMSE和ADL得分与基线比较差异无统计学意义?两组间不良反应的发生率均较低,且两组间差异无统计学意义?

结论:活血化瘀中药能维持患者认知功能,并且具有良好的安全性和耐受性,其远期疗效及安全性尚需大样本临床研究证实?

背景:全膝关节置换是晚期膝关节疾病常用的手术方法,如何促进患者术后早期康复,提高膝关节功能,对提高手术疗效和患者的满意度有重要意义?

目的:观察类风湿关节炎患者全膝关节置换术后早期进行推拿康复对股四头肌表面肌电的影响?

设计?场所?对象和干预措施:研究病例为复旦大学附属华山医院骨科和上海市长宁区光华中西医结合医院骨科2010年6月~2011年9月行全膝关节置换的类风湿关节炎患者,采用随机对照试验设计方法,将66名接受全膝关节置换术的患者随机分为对照组和推拿组,每组33例?对照组行持续被动活动训练(continue passive motion, CPM),推拿组行CPM结合推拿康复,共治疗4周?

主要结局指标:在术前和术后4周,采用美国Western Ontario和McMaster大学骨关节炎指数(Western Ontario and McMaster Universities Osteoarthritis Index, WOMAC)问卷进行评分,采用等速肌力下表面肌电图测试来评价早期推拿治疗后膝关节功能和膝关节周围肌肉的生物电特性?

结果:经过4周的推拿综合康复干预后,推拿组的WOMAC问卷评分较对照组下降(P<0.01);推拿组股直肌?股内侧肌表面肌电图中位频率?积分肌电较对照组显著升高(P<0.01)?

结论:推拿可促进全膝关节置换患者恢复,通过提高股四头肌肌电募集水平,延缓肌肉疲劳?

目的:构建骨质疏松症中医定性证候轻重程度量化评价模型?

方法:整理归纳国内有关骨质疏松症症状与证候的相关研究文献,以100 mm刻度法结合症状轻重分级赋分法对症状轻重程度进行初步量化,再用综合评价层次分析法确立骨质疏松症中医常见定性证候量化评价目标树层次?然后应用“综合集成研讨厅”专家研讨的方法,组织专家对该模型进行研讨?研讨内容包括确立每个症状轻重量化方法,对定性证候轻重程度层次分析模型中的各层次评价指标进行权重估计,初步构建定性证候轻重程度量化评价层次分析模型?最后在临床上选择220例患者,将该模型运算结果与专家模糊判断结果进行比较?

结果:通过以上程序,构建了骨质疏松症精亏证?气虚证?阴虚证?阳虚证?血瘀证的轻重程度量化评价模型,并将其用于220例骨质疏松症患者证候判断?统计1 545份骨质疏松症专家判断表结果与量化评价模型判定结果发现,两者完全拟合加基本拟合率为80.91%(1 250/1 545),如果加上部分拟合,则拟合率达到94.05%?

结论:骨质疏松症常见定性证候轻重程度量化评价模型与专家模糊判断有较高的符合率,操作性强,值得在临床上推广应用?

目的:应用光谱测色法检测原发性肝癌不同证型患者的舌色资料,并进行其舌色的色度学比较研究,探讨原发性肝癌不同辨证分型的舌色特点以及舌色和证型之间的关系?

方法:应用光谱测色法采集133名原发性肝癌患者的舌色数据资料,根据临床特点辨证为肝郁脾虚?湿热蕴结?肝肾阴虚?气滞血瘀4类证型,观察各证型色度坐标?主波长分布?兴奋纯度的变化特点和CIE LAB均匀色彩空间分布特点,比较各型色度角?彩度的区别,并分析不同证型之间总色差?明度差?色度差?饱和度差?色相差等参数的区别?

结果:原发性肝癌患者不同证型舌色的色度坐标分布不同;气滞血瘀型的主波长分布明显不同于其他3个证型;兴奋纯度值在肝郁脾虚?湿热蕴结?肝肾阴虚型肝癌患者呈现为逐渐增加的特点(P<0.01);不同证型舌色于CIE LAB三维色空间分布区域不同;色度角结果提示气滞血瘀型为负值,与其他3型明显不同(P<0.01);肝郁脾虚?湿热蕴结?肝肾阴虚型的彩度值呈现为逐渐增加的特点(P<0.01),与兴奋纯度的结果一致;色差比较中,以人眼观察能力为衡量方式的结果量化了不同证型舌色的各矢量差别?

结论:原发性肝癌不同证型患者的舌色存在着明显色差,与临床舌色的特点相符,这将为原发性肝癌中医辨证分型标准的统一提供客观参考,有利于舌诊度量的标准化与规范化?

目的:探索补肾中药淫羊藿有效成分淫羊藿苷对间充质干细胞株C3H10T1/2的促成骨分化作用,及该作用与丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase, MAPK)信号通路的相关性?

方法:体外培养间充质干细胞株C3H10T1/2,给予淫羊藿苷(0?10 ^-7?10 ^-6?10 ^-5和10 ^-4 mol/L)联合成骨诱导液干预26 d后,碱性磷酸酶(alkaline phosphatase, ALP)染色观察成骨分化情况?10 ^-5 mol/L淫羊藿苷干预C3H10T1/2细胞2?8?24与48 h后,实时荧光定量聚合酶链式反应法(polymerase chain reaction, PCR)检测p38?细胞外调节蛋白激酶(extracellular signal-regulated protein kinase, p42/44)mRNA的表达?10 ^-5 mol/L淫羊藿苷干预C3H10T1/2细胞10?30?60和120 min后,蛋白质印迹法检测p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 mitogen-activated protein kinase, p38)?p42和p44,以及翼式转录因子氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase, JNK)及其磷酸化产物的蛋白表达情况?

结果:10 ^-5 mol/L淫羊藿苷联合成骨诱导液的促进C3H10T1/2细胞成骨分化能力最强?PCR结果显示,淫羊藿苷作用2 h后p38基因表达显著下调(P<0.01);p42和p44 mRNA水平在淫羊藿苷干预2 h后均显著下调(P<0.01),而在淫羊藿苷干预48 h后表达均上调(P<0.05,P<0.01);其他时间点各通路基因表达情况均无显著变化(P>0.05)?10 ^-5 mol/L淫羊藿苷作用10 min后,磷酸化p42/44蛋白表达减弱,磷酸化p38蛋白表达增强,并持续到30 min,但对JNK蛋白的表达无明显影响?

结论:淫羊藿苷促进间充质干细胞株C3H10T1/2向成骨细胞分化,其作用可能与激活p38和抑制ERK蛋白的表达有关?

目的:观察丹蛭降糖胶囊联合运动对糖尿病大鼠胰腺c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase, JNK)信号通路的影响,探讨其治疗糖尿病的可能机制?

方法:雄性Wistar大鼠78只,用小剂量链脲佐菌素联合高脂饲料的方法建立糖尿病大鼠模型,并将造模成功的60只大鼠分为模型组?运动组?丹蛭降糖胶囊组及运动联合丹蛭降糖胶囊组;另取12只大鼠作为正常对照?治疗8周后,用免疫组织化学法?蛋白质印迹法检测大鼠胰腺组织中磷酸化JNK(phospho-JNK, p-JNK)?胰腺十二指肠同源异型盒基因1(pancreatic and duodenal homeobox-1, PDX-1)及胰岛素的表达水平?

结果:模型组胰腺组织中的p-JNK表达水平明显高于正常对照组(P<0.01),而PDX-1和胰岛素含量则明显低于正常对照组(P<0.01);给予中药?运动干预能明显抑制JNK的活性,提高PDX-1和胰岛素的表达水平(P<0.05,P<0.01)?

结论:运动及丹蛭降糖胶囊联用可能是通过抑制糖尿病大鼠JNK信号通路,对糖尿病胰岛β细胞起保护作用?

目的:探讨消癖丸干预二甲基亚硝胺(dimethylnitrosamine, DMN)诱导的大鼠肝纤维化的作用?

方法:采用0.5%的DMN溶液2 mL/kg体质量腹腔注射,每周连续注射3 d,每日1次,共4周,制备大鼠肝纤维化模型?第3周开始模型大鼠随机分为模型对照组和消癖丸组,消癖丸组给予消癖丸煎剂灌胃,模型对照组给予等量的生理盐水?治疗2周后,观察大鼠肝功能?肝组织病理学改变及肝纤维化相关指标α平滑肌肌动蛋白(alpha-smooth muscle actin, α-SMA)?转化生长因子β1(transforming growth factor-β1, TGF-β1)?组织金属蛋白酶抑制剂1(tissue inhibitor of metalloproteinase-1, TIMP-1)和血红素氧合酶1(heme oxygenase-1, HO-1)表达的变化?

结果:(1)与正常大鼠比较,造模2和4周时模型大鼠血清丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase, ALT)?天冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase, AST)?碱性磷酸酶(alkaline phosphatase, ALP)活性逐渐升高(P<0.01或P<0.05),4周时血清总胆红素(total bilirubin, TBil)含量显著增加(P<0.05);与4周模型组比较,消癖丸组血清ALT?AST?ALP?TBil水平均显著降低(P<0.01或P<0.05)?(2)模型大鼠肝组织炎症反应及胶原沉积逐渐加重,4周时部分大鼠肝组织已形成完整包绕的假小叶结构,肝组织羟脯氨酸(hydroxyproline, Hyp)含量显著增加(P<0.01);与4周模型组比较,消癖丸组肝组织炎症?胶原沉积明显减轻,肝组织Hyp含量显著降低(P<0.05)?(3)模型大鼠肝组织α-SMA蛋白表达逐渐增加,4周时显著高于2周模型组(P<0.01);聚合酶链式反应分析显示,肝组织α-SMA?TGF-β1?TIMP-1和HO-1 mRNA的表达随着模型的进展逐渐升高(P<0.01);与4周模型组比较,消癖丸组肝组织α-SMA蛋白的表达及α-SMA?TGF-β1?TIMP-1?HO-1 mRNA的表达均显著降低(P<0.01或P<0.05)

?结论:消癖丸能够显著抑制DMN诱导大鼠肝纤维化的进展,且这一作用机制可能与抑制肝星状细胞活化有关?

目的:研究海南蒲桃提取物对砷酸盐引起的L6骨骼肌细胞葡萄糖内稳态破坏及线粒体功能异常的缓解作用?

方法:通过测量多个指标如丙酮酸激酶活性?葡糖激酶?线粒体膜电位等衡量细胞内葡萄糖水平及线粒体功能,并测量相关标志物的蛋白质及mRNA表达情况,如葡萄糖转运体4?胰岛素受体基质1?胰岛素受体基质2?葡糖激酶等以分析可能有关的信号通路?

结果:海南蒲桃提取物能够通过葡萄糖转运体4通路改善砷中毒的L6细胞内诸多标志物的表达,使其正常化,与模型组相比差异有统计学意义?

结论:海南蒲桃提取物对细胞砷中毒有明显的缓解作用,未来可考虑将其用于治疗砷中毒相关疾病如高血糖症等?

目的:通过N-亚硝基二乙胺(N-nitrosodiethylamine, DENA)诱导白化小鼠肝癌,研究金刚簒水乙醇提取物抗小鼠肝毒性的作用?

方法:在给予实验小鼠口服50 mg/kg的DENA两周前,先予150或400 mg/kg金刚簒水乙醇提取物或浓度为0.5%或1%的丁基羟基茴香醚(butylated hydroxyanisole, BHA)连续灌胃?测定各组小鼠肝脏内细胞色素(cytochrome, Cyt)P450及b5,还原型谷胱甘肽(reduced glutathione, GSH)?谷胱甘肽转移酶(glutathione-S-transferase, GST)以及肝组织天冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransaminase, AST)?丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransaminase, ALT)?碱性磷酸酶(alkaline phosphatase, ALP)活性及总胆固醇和蛋白质含量?

结果:口服50 mg/kg的DENA可显著降低Cyt P450?Cyt b5以及GSH?GST的浓度(P<0.01),肝组织AST?ALT?ALP活性和总蛋白含量也显著降低(P<0.01),但总胆固醇含量显著增加?经150或400 mg/kg金刚簒水乙醇提取物预处理14 d的实验小鼠,其由DENA诱发的各项组织生化指标异常发生显著逆转(P<0.01)?

结论:金刚簒水乙醇提取物可通过提高细胞抗氧化活性?减少自由基的生成来减少致癌物DENA造成的肝脏损伤?