辨证论治是中医诊断疾病的传统模式,建立科学的证候诊断标准是中医药研究中的一个重要环节。本文回顾了现有相关证候诊断标准的基本模式及存在的问题,指出将西医的疾病与中医的证候相结合,建立基于证候要素的病证结合证候诊断标准具有较大的优势。这种证候诊断标准,既考虑了病的特异性,又解决了辨证的复杂性和灵活性,且便于临床操作使用。同时,本文还阐述了该诊断标准的基本模式、结构组成及建立时应采用的流程和方法。

大鼠和小鼠辨证论治方法和标准是具有中医药行业特色的方法和标准,其建立有助于满足中医药辨证论治研发的需要。本文介绍了建立大鼠和小鼠辨证论治标准所开展的系列研发工作,发现：（1）大鼠和小鼠可以用于模拟中医临床的诊法和辨证,可以采集到大量的四诊信息,满足辨证论治的需要;（2）利用大鼠和小鼠可以实现诊法和辨证的标准化、计量化,所建立的方法便于实验操作与普及;（3）正常大鼠和小鼠存在体质和证候的差异,常见疾病大鼠和小鼠会自发形成证候,发生证候的兼夹和演变,与人类近似;（4）证候存在复杂的物质基础,涉及神经内分泌免疫网络各组织基因表达与剪接的差异;（5）利用大鼠和小鼠可以开展个体化辨证论治及计量化疗效比较与评价。该方法和标准的主要用途包括：（1）证候模型动物的证候属性鉴定;（2）中医基础学科的研究,如藏象理论、证候的物质基础、辨证论治方法和作用机制、中医诊断学等研究;（3）中医临床学科的研究,如辨证论治疗效的比较与评价、辨证论治方案的优化、防治未病的研究;（4）中药学科的研究,如中药药性的研究、中药和方剂的药理研究等。

背景

干扰素联合利巴韦林是慢性丙型肝炎的常规治疗方法,然而,该疗法存在一定副作用,对部分患者疗效不佳,且治疗费用昂贵。中医药治疗慢性肝病包括丙型肝炎有大量报道,需要进行系统综述。
目的

运用循证医学系统综述方法评价中草药治疗慢性丙型肝炎的疗效和安全性。检索策略：MEDLINE、Cochrane图书馆（2009年第3期）、中国学术期刊全文数据库、中文科技期刊全文数据库、中国生物医学文献数据库、中文生物医学期刊数据库、中医药期刊文献数据库。检索日期截止2009年7月8日。纳入标准：收集比较中草药与安慰剂、非特异性治疗、干扰素治疗丙型肝炎的随机对照试验。中草药联用干扰素与单用干扰素比较的试验也予以纳入。资料提取与分析：两人独立提取资料,采用Cochrane协作网提供的软件RevMan 5.017进行资料分析。结局的效应指标为相对危险度或均数差,均以95%可信区间表示。
结果

51篇随机对照试验满足纳入标准,共治疗3 678名病人。所纳入的6篇英文文献质量较高,中文文献质量普遍偏低。在临床症状、肝功能及抗病毒效应的综合疗效分析中,中草药明显优于非特异性治疗,与干扰素疗效相当,中药联合干扰素与单用干扰素比较,差异无统计学意义。中药对血清丙型肝炎病毒（hepatitis C virus, HCV）RNA阴转的效果明显优于非特异性治疗,与干扰素抗病毒治疗比较,差异无统计学意义,而与干扰素合用的疗效优于单用干扰素;中药及其与抗病毒药物合用的抗HCV抗体阴转疗效均优于单用干扰素治疗。在改善肝功能指标上中药显著优于安慰剂、非特异性治疗,且与干扰素抗病毒治疗比较,差异无统计学意义,但与抗病毒治疗联合使用则优于单用抗病毒治疗。随访的疗效分析表明上述效应具有持续性。中药注射剂及抗病毒治疗均有一定的副作用,个别患者有较严重的副作用。
结论

纳入本系统综述的部分中草药治疗慢性丙型肝炎具有改善症状、促进肝功能恢复和清除血清HCV标志物的作用。但是由于中文发表的临床试验质量较低,对那些疗效较好的中药制剂需要作进一步的验证,试验的设计及报告应按照国际规范执行。

目的

探讨糖尿病中医证型与股动脉血管回声跟踪技术检测指标之间的关系,为临床早期防治糖尿病下肢动脉病变提供依据。
方法

纳入147例2型糖尿病患者,均接受基本信息和中医临床信息的采集以及股总动脉血管回声跟踪技术检测。所有病例都进行中医辨证分型,观察各中医证型与股总动脉压力-应变弹性系数（pressure-strain elastic modulus, Ep）、硬化参数β、动脉顺应性（arterial compliance, AC）、脉搏波传导速度β（pulse wave velocity β, PWVβ）和管径增大指数（augmentation index, AI）之间的关系。
结果

阴阳两虚证的Ep明显高于气阴两虚证,硬化参数β明显大于气阴两虚、阴虚热盛和湿热困脾3种证型,AC明显小于阴虚热盛证,PWVβ明显大于阴虚热盛和气阴两虚证,AI明显大于阴虚热盛证。气阴两虚证的硬化参数β明显大于湿热困脾证。兼血瘀证患者的Ep明显大于无血瘀证者,AC明显小于无血瘀证者。
结论

血管回声跟踪技术检测可获知下肢动脉弹性的减退。本研究显示阴阳两虚、湿热困脾兼血瘀证的糖尿病患者下肢动脉硬化较严重。血管回声跟踪技术检测指标中的硬化参数β、AC和PWVβ可能成为早期糖尿病下肢动脉硬化的客观评估指标。

目的

研究慢性乙型肝炎（chronic hepatitis B, CHB）患者不同脾虚兼证与外周血树突状细胞（dendritic cell, DC）表型及功能的关系。
方法

CHB患者60例,按中医证候诊断标准分为脾虚肝郁、脾虚湿热和脾肾两虚组,每组20例,10名健康人为正常对照。分离各组外周血单个核细胞,体外诱导培养DC,流式细胞仪测定DC表型,酶联免疫吸附检测法测定DC分泌白细胞介素10（interleukin-10, IL-10）浓度,同步检测患者生化指标及乙肝病毒的脱氧核糖核酸（hepatitis B virus DNA, HBV-DNA）水平。
结果

CHB患者DC体外诱导增殖能力较正常人下降,DC成熟表面标记物显著低于正常人（P<0.05）。不同证候CHB患者DC表面标记物CD80、CD86和CD1a表达阳性率均低于正常人（P<0.05）。脾虚肝郁证患者CD80、CD1a和HLA-DR表达阳性率显著高于脾肾两虚证（P<0.05）,脾虚湿热证患者CD1a表达阳性率显著高于脾肾两虚证（P<0.05）。CHB患者DC培养上清中IL-10浓度显著高于正常人（P<0.05）。脾肾两虚证患者DC培养上清中IL-10含量高于脾虚肝郁证（P<0.05）。
结论

在CHB发病过程中,不同脾虚兼证CHB患者DC的表型及功能间存在差异,提示中医证候分类与机体免疫功能之间存在一定相关性。

目的

探讨腹腔注射银杏叶提取物（Ginkgo biboba extract,EGb 761）对豚鼠视神经横断伤后视网膜神经节细胞（retinal ganglion cell, RGC）形态及功能的保护作用。
方法

75只白化豚鼠随机等分为正常对照组、假手术组、模型组、生理盐水组和EGb 761组。分离暴露豚鼠的右眼视神经并于球后1.0 mm处进行横断造模,正常对照组不作任何处理,假手术组仅分离暴露视神经。生理盐水组和EGb 761组分别于实验开始前1周每日腹腔注射1次相应体积生理盐水和EGb 761（100 mg/kg）,术后继续给药4周。术后第4天,各组随机处死3只豚鼠,采用脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记(terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated deoxyuridine triphosphate-biotin nick end-labeling, TUNEL)法检测RGC凋亡;分别于术后第14和28天进行图形视网膜电图（pattern electoretinogram, PERG）检查;摘取眼球作组织病理学检查并计数视网膜垂直经线RGC数目。
结果

术后第4天,正常对照组、假手术组和EGb 761组均未见TUNEL阳性RGC,模型组和生理盐水组均见有TUNEL阳性RGC。术后第14和28天,模型组和生理盐水组RGC数目均少于正常对照组和假手术组（P<0.05）,EGb 761组少于正常对照组和假手术组（P<0.05）,但显著多于模型组和生理盐水组（P<0.05）;术后第14和28天,EGb 761组PERG的N95振幅较模型组和生理盐水组高（P<0.05）,与模型组和假手术组相近（P>0.05）。RGC数目与N95振幅呈正相关（r=0.859, P=0.001 5）。
结论

腹腔注射银杏叶提取物EGb 761能抑制豚鼠视神经横断后的RGC凋亡,对RGC的结构和功能具有保护作用。

目的

采用 ¹⁸F氟脱氧葡萄糖（ ¹⁸F-fluorodeoxyglucose, ¹⁸F-FDG）正电子发射体层扫描（position emission tomography,PET）心肌代谢显像技术评价分葱白提取物对猪缺血再灌注损伤心肌细胞活力的影响。
方法

 将24只猪随机分为假手术组、空白模型组、曲美他嗪组和葱白提取物组,每组6只。通过球囊封堵冠状动脉制备缺血再灌注模型。造模后第4天,葱白提取物组用葱白提取物灌胃（5.93 mg/kg,2次/d）,曲美他嗪组灌胃曲美他嗪（0.36 mg/kg,2次/d）,其他两组给同体积生理盐水,连续给药28 d。各组于最后一次给药后1 h行 ¹⁸F-FDG PET/CT心肌显像检测,采用4级评分法评价相应节段心肌细胞活力。
结果

分葱白提取物与曲美他嗪均可改善缺血再灌注心肌细胞活力而保护心肌细胞,与空白模型组比较,差异有统计学意义（P<0.01）;葱白提取物组与曲美他嗪组比较,差异无统计学意义（P>0.05）。
结论

分葱白提取物可以改善猪缺血再灌注心肌细胞活力。

目的

观察缺氧环境下白藜芦醇（resveratrol,Res）提高人鼻咽癌细胞株CNE2对化疗药物敏感性的作用并探讨其机制。
方法

将不同浓度白藜芦醇加入化疗药物干预过的CNE2中,低氧培养48 h,甲基噻唑基四唑法检测CNE2中白藜芦醇对化疗药物的逆转倍数,流式细胞仪检测细胞凋亡情况,应用反转录聚合酶链式反应和蛋白质印迹法检测CNE2细胞中多药耐药相关基因1(multidrug resistance gene 1,mdr1)、多药耐药相关蛋白1(multidrug resistance-associated protein 1,MRP1)和缺氧诱导因子1α（hypoxia inducible factor 1α,HIF-1α）mRNA和蛋白水平的表达变化。
结果

缺氧环境下白藜芦醇对化疗药物具有协同增效作用,200 μmol/L白藜芦醇对紫杉醇的逆转倍数为2.58。25、50、100和200 μmol/L白藜芦醇与紫杉醇合用,使紫杉醇诱导的CNE2细胞凋亡增加,且表现出明显的浓度依赖效应。此外随着白藜芦醇浓度的增加,mdr1、MRP1和HIF-1α的表达显著降低,加用白藜芦醇组与不加白藜芦醇组比较,差异有统计学意义（P<0.01）。
结论

白藜芦醇可以通过下调核转录因子HIF-1α及多药耐药相关基因mdr1、MRP1的表达提高缺氧环境中鼻咽癌细胞株CNE2对化疗药物的敏感性。

目的

从影响钙动员角度,探讨痛泻要方抑制大鼠结肠平滑肌收缩的作用机制。
方法

应用离体平滑肌张力测定方法,观察痛泻要方对乙酰胆碱（acetylcholine, ACh）、氯化钾（KCl）和细胞内钙库耗竭后细胞外Ca ²⁺内流引起的大鼠结肠平滑肌收缩的影响。
结果

痛泻要方能够抑制KCl和细胞内钙库耗竭后细胞外Ca ²⁺内流引起的大鼠结肠平滑肌收缩,并呈浓度依赖性。3 000 μg/mL 痛泻要方还能抑制ACh引起的第二收缩时相张力,与不加药的对照组（Krebs液）比较,差异有统计学意义（P<0.01）;痛泻要方对ACh引起的第一收缩时相张力无明显影响。
结论

痛泻要方主要通过抑制胞外Ca2+内流来抑制大鼠结肠平滑肌的收缩,可能涉及到阻断电压门控钙通道、钙库调控性钙通道和受体操纵性钙通道,但不影响ACh引起的胞内Ca2+释放。

目的

 观察虎杖痛风颗粒对环氧化酶（cyclooxygenase,COX）和5-脂氧化酶（5-lipoxygenase,5-LOX）活性的影响,探讨虎杖痛风颗粒抗炎的可能机制。
方法

健康志愿者全血标本加入钙离子载体A23187予以刺激,以阿司匹林为对照,通过酶联免疫吸附测定（enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA）法检测血栓素B2（thromboxane B2,TXB2）含量考察不同浓度的虎杖痛风颗粒溶液对COX-1活性的影响;健康志愿者全血经阿司匹林灭活COX-1后,予脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）刺激后,以塞来昔布为对照,通过ELISA检测前列环素I2（prostaglandin I2,PGI2）含量考察不同浓度虎杖痛风颗粒溶液对COX-2活性的影响;大鼠皮下植入含0.5%花生四烯酸溶液的棉球,收集渗液中的多形核白细胞（polymorphonuclear leukocyte,PMN）,采用反相高效液相色谱法测定白细胞三烯B4（leukotriene B4,LTB4）含量考察不同剂量虎杖痛风颗粒对5-LOX活性的影响。
结果

低浓度虎杖痛风颗粒组TXB2浓度较高浓度虎杖痛风颗粒组和阿司匹林组升高（P<0.05）;高、低浓度虎杖痛风颗粒组PGI2浓度较塞来昔布组明显升高（P<0.05）,高、低浓度虎杖痛风颗粒组之间比较,差异无统计学意义（P>0.05）;空白对照组LTB4含量较高、低剂量虎杖痛风颗粒组和地塞米松组高（P<0.05）。
结论

 虎杖痛风颗粒能通过抑制COX和5-LOX的活性减少TXB2、PGI2和LTB4等炎症介质的释放。

目的

研究短期手法针刺足三里治疗对脂多糖诱导的实验性大鼠急性肺损伤的预防作用。
方法

根据是否进行脂多糖刺激及采用的针刺方法的不同,将32只Wistar大鼠随机分为4组,即正常对照组、模型组、假针刺组和针刺组,每组8只。假针刺组和针刺组大鼠行手法针刺治疗,连续治疗4 d,每次5 min。第4天针刺后采用脂多糖刺激诱导大鼠急性肺损伤。第5天,收集外周血、支气管肺泡灌洗液和骨髓等进行白细胞计数。
结果

血细胞计数和支气管肺泡灌洗液细胞计数提示,针刺可减轻急性肺损伤大鼠的炎性反应,假针刺也有轻微的效果。正常对照组和模型组大鼠无明显的炎性反应。与正常对照组比较,模型组肺泡灌洗液中细胞计数增加;与假针刺组比较,针刺组肺泡灌选液中细胞计数减少,但差异没有统计学意义。
结论

预防性手法针刺足三里可减轻脂多糖诱导的大鼠急性肺损伤,但其相关免疫机制仍待进一步的研究。