本文从中医腧穴学出发,结合西医解剖学、神经学理论,探讨穴位深度与针刺靶点问题,分析了一直以来针刺和选穴操作不规范的原因及针刺神经节、神经孔的理论依据;以原发性三叉神经痛为例,提出将下关、攒竹、四白、夹承浆定位于蝶腭神经节及相应神经孔（眶上孔、眶下孔及颏孔）的针刺方法;认为规范穴位针刺靶点,既符合针刺临床试验干预措施报告标准对针刺细节的国际化要求,也有利于针灸技术的规范化研究,对于临床规避风险、提高针刺疗效具有现实意义。

科研中经常遇到涉及两个因素的实验,若两因素有交互作用,则需采用析因设计、正交设计等设计类型,但这些设计通常需要进行较多次实验。若在理论和专业上可以证明,实验中涉及到的两个因素不存在交互作用,或交互作用对观测结果的影响无统计学意义,并且特定实验条件（通常为各因素不同水平的一种组合）下实验数据的测定误差在专业上允许的范围之内,则可采用无重复实验的随机区组设计、无重复实验的平衡不完全随机区组设计、具有一个重复测量的单因素设计、无重复实验双因素设计和两因素嵌套设计。本文结合实例,重点介绍后两种实验设计类型。

目的:筛选慢性阻塞性肺疾病（chronic obstructive pulmonary disease, COPD）合并肺源性心脏病中医主症患者报告结局（patient-reported outcome, PRO）量表中所需量尺词语。

方法:COPD合并肺源性心脏病中医主症PRO量表的频率程度量尺词语为5个等级等距序位词语。在调查问卷中有32个备选的量尺词语,30名受访者根据自己对各个词语反应频率程度的强弱的理解在1条10 cm的线段上（0~10 cm）标示每个词语在线段上的位置,然后用尺子测量其数值,用Excel软件统计出每个词语的平均数、标准差、中位数;选出5个相对等级等距的量尺词语。

结果:选出症状频率的量尺词语为“从来没有”、“不常有”、“一半有一半没有”、“很常有”、“一直有”。

结论:本研究选出的量尺词语,符合COPD合并肺源性心脏病中医主症PRO量表的需要。关键词:慢性阻塞性肺疾病; 肺心病; 反应尺度; 量表; 临床研究

目的:运用数据挖掘技术研究广泛性焦虑症的中医证候学规律。

方法:2009年8月1日至2010年7月31日,在北京地区10家分中心进行为期1年、针对705例广泛性焦虑症患者的中医证候学观察,通过专家组指导,运用数据挖掘技术中的贝叶斯网络技术和聚类分析建立中医证候模型,分析广泛性焦虑症的中医证候学规律。

结果:调查共纳入广泛性焦虑症的症状61项,运用贝叶斯网络技术建立61项症状的关系模型,提取了9个证候要素和5个证候靶位;运用聚类分析提取了8个证候类型。将两种方法重合的结果进行筛选,并结合专家经验和中医理论,确定广泛性焦虑症的6个证候类型,分别为肝郁化火、肾虚肝旺、痰热扰心、心脾两虚、肝郁脾虚、心肾不交,并制订了《广泛性焦虑症的中医证候诊断标准（草案）》。

结论:数据挖掘技术中的贝叶斯网络和聚类分析在中医证候建模、挖掘证候规律等方面具有一定的应用前景,适合应用于中医证候规律的研究。

目的:探讨缺血性中风病证候要素与近期预后的关系。

方法:动态采集缺血性中风病患者发病第1、7和14天的“缺血性中风证候要素诊断量表”（内风、内火、痰湿、血瘀、气虚、阴虚）评分及美国国立卫生研究院卒中量表（National Institutes of Health Stroke Scale, NIHSS）评分。以发病第14天的NIHSS评分作为缺血性中风病患者近期预后的评价指标,并依据评分进行分组（发病第14天NIHSS评分≥7作为近期预后不良组,NIHSS评分<7分为预后良好组）,应用logistic回归模型探讨缺血性中风病急性期证候要素与近期预后的关系并利用受试者操作特征（receiver operating characteristic, ROC）曲线来评价模型的预测能力。根据logistic回归模型得到的结果,进一步应用两样本重复测量数据方差分析比较血瘀证组与非血瘀证组发病第1、7和14天的NIHSS评分。

结果:发病第14天的血瘀证（比值比为2.924, 95%置信区间为1.231~6.946, P=0.015）和发病第1天的神经功能缺损程度（比值比为1.956, 95%置信区间为1.701~2.250, P=0.000）是预测缺血性中风病近期预后的独立危险因素。Logistic回归模型的ROC曲线下面积为0.95。从重复测量均数变化趋势图可看出,血瘀证患者的神经功能缺损程度较非血瘀证患者重,且其NIHSS分值在疾病过程中持续高于非血瘀证组。

结论:血瘀证为缺血性中风近期预后的独立危险因素,临床上积极采取活血化瘀治疗将有助于改善疾病的近期预后。本研究还为实施缺血性中风病急性期中西医结合综合治疗方案动态证候干预提供了循证依据及数据支持。

目的: 采用巢式病例对照研究评价中医药治疗糖尿病肾病的疗效并探讨该设计在中医药疗效评价中应用的可行性。

方法: 采用巢式病例对照研究设计,以队列研究纳入的糖尿病肾病患者为研究的源人群,按病例组与对照组1∶4的比例选取研究对象,要求病例组与对照组在年龄、性别、民族等方面相匹配。采用EpiData 3.1软件录入数据,应用SAS软件采用条件logistic回归的方法分析治疗方案（中西医结合与单纯西医治疗）与糖尿病肾病疾病进展的关系;对巢式病例对照研究的把握度进行估计,根据现有资料对巢式病例对照研究和队列研究的样本含量进行再估计。

结果: 共纳入发生终点结局事件的病例8例作为病例组,匹配未发生结局事件的对照病例32例作为对照组,病例组与对照组在文化程度、停药、治疗方案改变和辨证论治等方面比较差异无统计学意义,病例组与对照组接受的治疗方案分布差异无统计学意义（比值比=0.725,95%置信区间为0.174~3.030)。根据该结果反推计算的把握度为5%。如需达到80%的把握度,1∶4病例对照研究样本含量为1 350（270∶1 080）,1∶1为880（440∶440）,1∶1队列研究样本含量为1 020（510∶510）。

结论本研究未发现中西医结合治疗方案、西医治疗方案与糖尿病肾病疾病进展的关系。巢式病例对照研究可以应用于中医药疗效评价,但是应开展中医药疗效的前期基础研究如横断面研究,以期为病例对照研究、队列研究和随机对照试验的验证研究提供样本量估算的依据。

目的:在针灸治疗贝尔麻痹的过程中,依据面神经麻痹程度进行面神经功能障碍评价分级,并观察该分级与疗效、疗程的关系及在判断预后方面的作用。

方法:以面瘫常用运动功能评价量表House-Brackmann量表为准,并对眼裂和唇角设定量标准,治疗前和治疗结束时,根据该量表评分对患者面部瘫痪程度进行面神经功能障碍评估分级,依次分为轻度、中度、中重度、重度功能障碍和完全麻痹5个级别。按患者疾病分期采用针刺对症治疗,不人为设定治疗时程,全程观察,以最终疗效为准。

结果:68例病例中,治愈53例,总有效率为97%。5种不同面神经功能障碍之间的治疗效果差异有统计学意义（P<0.01）;疗效与病情轻重相关,等级相关分析相关系数为0.423 (P<0.01);其疗程也随着面神经功能障碍级别加重而延长（P<0.01）。

结论:贝尔麻痹患者存在面神经功能障碍轻重的差别,针灸治疗的效果随着面神经功能障碍的加重而下降,不同级别面神经功能障碍患者治疗所需疗程不同。临床研究中非常有必要对患者进行评估分级后再做观察治疗,并依据病情轻重程度选择不同治疗方法。

背景: 随着对干眼症发病机制中免疫炎性反应认识的不断深入,鉴于目前治疗上使用的人工泪液对症状缓解的有限性及各种促进泪液分泌药物或治疗手段的局限性,临床医生更加关注能促进泪液主动分泌的治疗手段,针刺治疗干眼症可能符合此要求。

以人工泪液泪然滴眼液为对照治疗药物,观察针刺对干眼症患者泪液中乳铁蛋白含量及泪液分泌的影响及效应持续时间,探讨针刺治疗干眼症的作用机制。设计、场所、对象和干预措施：所有患者均为2010年8月至2011年5月在上海中医药大学附属曙光医院眼科门诊就诊的、首次诊断为干眼症的患者。采用随机对照试验的设计方法,收集干眼症患者共65例（65眼）,随机分为针刺治疗组及对照组,分别给予针刺治疗及人工泪液治疗3周。主要结局指标：采用酶联免疫吸附法测定治疗前后干眼症患者泪液中乳铁蛋白含量,来评价针刺对干眼症治疗的有效性。

结果:与治疗前比较,治疗3周后针刺组泪液中乳铁蛋白浓度升高,泪膜破裂时间延长,基础泪液分泌量增加,且均优于对照组;对照组的乳铁蛋白浓度、泪膜破裂时间、基础泪液分泌量与治疗前比较,差异无统计学意义。治疗结束后1周,针刺治疗组患者的基础泪液分泌量、泪液中乳铁蛋白含量与治疗3周时比较差异无统计学意义,而泪膜破裂时间缩短;针刺组泪液中乳铁蛋白含量、泪膜破裂时间与对照组比较,差异无统计学意义,而基础泪液分泌量仍优于对照组。

结论:针刺治疗可以增加干眼症患者泪液中的乳铁蛋白含量,促进干眼症患者泪液的分泌,延长其泪膜破裂时间。但针刺治疗对干眼症患者泪液分泌的改善及促进作用具有一定的时效性,随着治疗结束,治疗效应减弱。

目的:探讨玄参提取物（extracts of Radix Scrophulariae, ERS）对自发性高血压大鼠（spontaneously hypertensive rat, SHR）的血压、缩血管物质及动脉形态的影响。

方法:50只SHR随机分为SHR组、SHR加卡托普利（40 mg/kg）组、SHR加ERS小剂量（70 mg/kg）组、SHR加ERS中剂量（140 mg/kg）组和SHR加ERS大剂量（280 mg/kg）组;20只Wistar-Kyoto（WKY）大鼠随机分为WKY和WKY加ERS（140 mg/kg）组。各给药组口服相应剂量药物,WKY组与SHR组灌服蒸馏水,每天1次,连续给药20周。给药前及治疗过程中,每3周监测大鼠血压;于给药第21周取材,酶联免疫吸附测定法检测大鼠血清血管活性物质去甲肾上腺素（noradrenaline, NA）、血管紧张素Ⅱ（angiotensin Ⅱ, AngⅡ）、血栓烷A₂（thromboxane A₂, TXA₂）和6-酮前列腺素F_1α及血管内皮缩血管肽1（endothelin-1, ET-1）的浓度;取腹主动脉,苏木素和伊红染色分析腹主动脉形态变化,并计算中膜厚度和中膜厚度/内腔半径比值。

结果:给予ERS治疗3~21周可显著降低SHR的血压,显著降低血清NA、AngⅡ、TXA₂及血管ET-1的浓度,改善SHR腹主动脉组织的病理形态学变化,并显著降低其中膜厚度/内腔半径比值。ERS对WKY大鼠血压及血管活性物质的影响不大。

结论:ERS能显著降低SHR的血压,抑制其血管壁的增厚,显示出良好的降压作用和抗动脉硬化作用,其作用机制可能与抑制缩血管活性因子NA、AngⅡ、ET-1及TXB₂的释放有关。

目的:研究天芪平颤颗粒对左旋多巴诱发的异动症大鼠行为学及G蛋白偶联受体激酶6（G protein-coupled receptor kinase 6, GRK6）表达的影响。

方法:通过6-羟基多巴（6-hydroxydopa, 6-OHDA）立体定向注射至大鼠前脑内侧束的方法成功建立帕金森病（Parkinson disease, PD）模型。25只模型大鼠随机分为5组,每组各5只。PD组：腹腔注射0.2%维生素C溶液;左旋多巴组：腹腔注射左旋多巴甲酯和苄丝肼;小、中、大剂量天芪平颤颗粒组：在给予左旋多巴甲酯和苄丝肼基础上分别加用相应剂量的天芪平颤颗粒。另设假手术组（n=5）为对照。连续给药29 d后,评估不同剂量天芪平颤颗粒对PD模型大鼠行为学的影响,并用免疫组织化学法和蛋白质印迹法检测大鼠纹状体区GRK6蛋白的表达情况。

结果:左旋多巴等长期使用后,PD模型大鼠出现异常不自主运动（abnormal involuntary movement, AIM）,且AIM评分随治疗时间的延长逐渐增加;损伤侧纹状体区GRK6蛋白表达减少。天芪平颤颗粒能改善PD模型大鼠的AIM评分,增加GRK6蛋白的表达。免疫组织化学法结果显示,高、中剂量天芪平颤颗粒组的GRK6蛋白的表达较左旋多巴组增加（P<0.05）;蛋白质印迹法结果显示,中剂量天芪平颤颗粒组的GRK6蛋白的表达较左旋多巴组增加（P<0.01）。

结论:天芪平颤颗粒可能通过增加纹状体区GRK6的表达,改善PD模型大鼠的AIM评分,减少PD大鼠异动症的发生。

目的:研究从白屈菜乙醇提取物中分离出的白屈菜碱在诱导HeLa细胞凋亡中的作用及参与其作用的主要信号转导通路。

方法:细胞先以不同浓度白屈菜碱处理48 h,用噻唑蓝法分析确定半数致死量（median lethal dose, LD₅₀）。用4′,6-二脒基-2-苯基吲哚染色,追踪分析核浓染以及DNA损伤和碎片的形态学变化,并用流式细胞术分析检测活性氧（reactive oxygen species, ROS）的产生以及细胞周期阻滞和线粒体膜电位的变化。用圆二色光谱分析寻找白屈菜碱和小牛胸腺DNA可能的相互作用。用逆转录聚合酶链反应和蛋白免疫印迹法测定p38、p53、蛋白激酶B（protein kinase B, AKT）、磷脂酰肌醇3-激酶（phosphatidylinositol 3-kinases, PI3K）、Janus激酶3（Janus kinase 3, JAK3）、信号转导及转录激活因子3（signal transducer and activator of transcription 3, STAT3）等的mRNA和蛋白表达,以及E6、E7癌基因和促凋亡基因、抗凋亡基因的mRNA和蛋白表达。

结果:根据白屈菜碱的LD₅₀（30 μg/mL）,选定3种实验剂量,即22.5、30和37.5 μg/mL。结果显示,白屈菜碱抑制了HeLa细胞增殖,诱发其细胞凋亡,表现为ROS的产生,细胞亚G₁和G₀/G₁周期阻滞,线粒体膜电位变化和DNA碎片产生。圆二色光谱分析结果显示白屈菜碱和小牛胸腺DNA间存在有效的相互作用。信号通路的研究显示白屈菜碱通过上调p38、p53和其他促凋亡基因的表达,以及下调AKT、PI3K、JAK3、STAT3、E6、E7和其他抗凋亡基因的表达,有效诱发细胞凋亡。

结论:从白屈菜中分离出的白屈菜碱能通过改变p38-p53及AKT/PI3激酶信号转导通路有效地诱发HeLa细胞凋亡。

目的:评价调补肺肾（补肺健脾、补肺益肾、益气滋肾）三法对慢性阻塞性肺疾病（chronic obstructive pulmonary disease, COPD）稳定期大鼠全身和肺脏局部炎症反应的影响及远期效应。

方法:将大鼠随机分为6组：对照组、模型组、补肺健脾组、补肺益肾组、益气滋肾组和氨茶碱组。除对照组外,采用香烟熏吸联合细菌感染法制备COPD稳定期大鼠模型。于第9周分别以补肺健脾方、补肺益肾方、益气滋肾方和氨茶碱灌胃至第20周,于20、32周分批取材,观察外周血白细胞计数和中性粒细胞比率及血清、支气管肺泡灌洗液（bronchoalveolar lavage fluid, BALF）和肺组织白细胞介素1β（interleukin-1β, IL-1β）、IL-6、IL-8、IL-10、肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor-α, TNF-α）、可溶性TNF受体Ⅱ（soluble tumor necrosis factor receptor Ⅱ, sTNFR2）的水平。

结果:各组外周血白细胞计数和中性粒细胞比率比较,差异无统计学意义（P>0.05）。20周时模型组BALF中白细胞计数较对照组明显升高（P<0.01）,3个中药组及氨茶碱组均较模型组显著降低（P<0.01）,其中补肺健脾组白细胞计数明显低于氨茶碱组（P<0.05）;第32周,3个中药组的BALF中白细胞计数较氨茶碱组明显降低（P<0.05,P<0.01）,而3个中药组间比较,差异无统计学意义（P>0.05）。第20和32周,模型组血清和肺组织IL-1β、IL-6、IL-8、IL-10、TNF-α、sTNFR2含量,BALF中IL-8、IL-10、TNF-α水平均较对照组显著升高（P<0.05,P<0.01）;3个中药组上述因子均较模型组明显降低（P<0.05,P<0.01）,其中3个中药组血清、BALF和肺组织中细胞因子水平较氨茶碱组降低,而以血清和BALF改变明显（P<0.05,P<0.01）。第32周外周血清和BALF、肺组织炎症因子表达与20周时比较,差异无统计学意义。

结论:补肺健脾、补肺益肾和益气滋肾中药可显著降低COPD稳定期大鼠全身和肺脏局部的炎症反应,且具有良好的远期效应。

目的:研究口服玫瑰茄水提取物对大鼠肾Na ⁺-K ⁺-ATP酶和Ca ²⁺- Mg ²⁺-ATP酶活性的影响。

方法:连续28 d分别给予实验大鼠口服25和50 mg/kg的玫瑰茄水提物,同时给予对照组大鼠灌胃适当剂量的蒸馏水。用光谱测定法分析大鼠肾脏中Na ⁺-K ⁺-ATP酶和Ca ²⁺-Mg ²⁺-ATP酶的活性。

结果:口服25和50 mg/kg的玫瑰茄提取物后,实验组大鼠肾Ca ²⁺-Mg ²⁺-ATP酶活性显著降低（P<0.05）,然而肾Na ⁺-K ⁺-ATP酶的活性却未受到任何影响。实验组大鼠体质量、肾脏质量,血浆白蛋白和总蛋白浓度,碱性磷酸酶、天冬氨酸氨基转移酶、丙氨酸氨基转移酶活性以及血浆钠、钾、钙离子的浓度与对照组大鼠相比无明显变化;但大鼠的肌酐以及尿素水平均在服用50 mg/kg的玫瑰茄提取物后明显降低（P<0.05）。

结论:尽管口服玫瑰茄提取物会引起肾Ca ²⁺-Mg ²⁺-ATP酶活性的减弱,但同时可以起到保护肾脏功能的作用。

目的:研究西藏长叶松树皮乙醇提取物（alcoholic extract of bark of Pinus roxburghii Sarg., AEPR）的抗惊厥作用。

方法:用最大电休克和戊四唑诱发白化Wistar大鼠癫痫。最大电休克模型经由大鼠耳电极给予150 mA电流刺激0.2 s诱发癫痫,以后肢强直性伸展持续时间的变化作为结局指标衡量AEPR的抗惊厥作用,即后肢强直性伸展持续时间减少或停止。戊四唑模型大鼠经腹膜内注射戊四唑诱发肌阵挛性发作和阵发性抽搐,以痉挛发作的延迟衡量AEPR的抗惊厥作用。

结果:在最大电休克惊厥模型中,AEPR剂量分别为300和500 mg/kg体质量,均显著减轻所有阶段的大鼠惊厥发作（P<0.01）;标准对照药物苯妥英钠组用量25 mg/kg,能显著减轻屈曲阶段的发作（P< 0.01）,并抑制所有阶段的惊厥发作。戊四唑惊厥模型大鼠于注射戊四唑前30 min分别给予AEPR 300和500 mg/kg,均能显著延迟阵挛性发作（P<0.01）。100 mg/kg体质量的AEPR在戊四唑诱发的癫痫模型中没有显著的抗惊厥作用;标准对照药物地西泮4 mg/kg能大幅度延迟阵挛性发作。

结论:本研究提示AEPR能有效抑制普遍强直性肌阵挛和部分癫痫发作。因此,AEPR对最大电休克及戊四唑诱发的大鼠癫痫有抗惊厥作用。然而需要进一步的研究确认是AEPR中的何种成分对这种抗惊厥作用起主导作用。