队列研究在循证医学的证据等级中为Ⅱ级证据,仅次于随机对照试验,是临床医疗防治措施评价的重要证据来源之一。近年来开始在传统医学疗法评价中得到应用。本文较为系统地介绍了队列研究的基本概念、原理、设计类型、实施步骤以及在中医药领域运用的关键方法学问题,旨在为中医药的临床研究拓宽思路,为新方法的引用提供借鉴。

循证医学提倡任何健康相关决策的制订均需可靠证据的支持。系统评价是高质量证据的来源,能为临床医生、患者及其他决策者提供重要信息,但如果评价员没有很好地掌握系统评价的方法,特别是meta分析使用不当,会产生存在偏倚的、甚至不正确的结论,误导临床决策。因此,了解评价系统评价和meta分析质量的方法,有利于更好地使用系统评价研究的信息而不致盲从。

目的: 评价肝胆肿瘤治疗功能评定（Functional Assessment of Cancer Therapy-Hepatobiliary, FACT-Hep）量表用于中国原发性肝癌患者生活质量测定的效果。
方法: 对FACT-Hep量表翻译并进行必要的修订后,对2005年9月~2006年4月收治的180例原发性肝癌住院患者进行测定,考核量表的信度、效度和反应度。
结果: 各条目与其所在领域维度的相关系数较大（0.593 3±0.165 2）,与其他领域维度的相关系数较小（0.274 9±0.192 2）。因子分析提示量表的结构与概念构思基本相符,提取的6个主成分涵盖了量表的各个领域;标准关联效度相关系数为0.828;生理领域、社会领域、心理领域、功能领域、症状领域和总量表的重测相关系数分别为0.731、0.334、0.953、0.786、0.785、0.801;克朗巴赫α系数分别为0.739 7、0.419 3、0.791 4、0.825 0、0.839 9、0.916 1。不同肿瘤分期之间或不同Child-Pugh分级之间患者的生活质量评分具有统计学差异（P<0.05)。
结论: FACT-Hep量表用于中国原发性肝癌患者生活质量测定具有较好的信度、效度和反应度,因而具有一定的实用价值。

目的: 通过对缺血性中风急性期患者发病不同时点证候特点的研究,探讨缺血性中风阴、阳类证中医证候组成特征。
方法: 采用“中风病辨证诊断标准”对1 246例缺血性中风急性期患者发病后1~3 d、4~10 d、11~30 d 3个时点的中医证候特点进行了调查,分析缺血性中风急性期中医证候在3个时点的变化特点及阴、阳类证患者中6个基本证候分布的差异。
结果: 缺血性中风急性期患者风证的比率由1~3 d的87.1％降到11~30 d的79.3％（P<0.01）;火热证患者比率由1~3 d的52.1％降到11~30 d的38.7％（P<0.01）;患者痰证的比率由1~3 d的67.1％降到11~30 d的57.4％（P<0.01）;血瘀证、气虚证和阴虚阳亢证患者比率在3个调查时点差异无统计学意义（P>0.05）。缺血性中风急性期3个时点阴、阳类证分布比较差异无统计学意义（P>0.05）。阳类证患者中,风证、火证、痰证、阴虚阳亢证出现频率高于阴类证患者（P<0.01）,血瘀证、气虚证出现频率低于阴类证患者（P<0.05,P<0.01）。缺血性中风急性期证候组合在3个调查时点均以3个证候组合为主。阳类证患者中出现4、5个证候组合的频率高于阴类证患者,出现单证和两证组合的频率低于阴类证患者（P<0.05,P<0.01）。阴类证患者中证候组合出现频率最高的为风+痰+血瘀+气虚组合和风+痰+气虚组合。阳类证患者中证候组合出现频率最高的为风+火+痰+气虚组合和风+火+痰组合。
结论: 阳类证和阴类证证候组合最主要的区别为阳类证具有火热证特征,痰证、气虚证、血瘀证与阴阳分类的证候诊断无关。

目的: 探讨重症急性胰腺炎（severe acute pancreatitis, SAP）并发胰性脑病（pancreatic encephalopathy, PE）的危险因素。
方法: 回顾分析2005年1月至2006年12月收治的255例SAP患者的临床资料。31例SAP患者合并脑病,224例未合并脑病。分别总结其临床特点。
结果: PE组Ranson评分以及急性呼吸窘迫综合征（acute respiratory distress syndrome, ARDS）、肾功能衰竭、低蛋白血症、低钙血症和高血糖发生率均高于非PE组;两组急性生理学及慢性健康状况评分Ⅱ评分、CT严重指数评分、血淀粉酶和脂肪酶值、肝功能衰竭发生率、感染率及手术率,差异无统计学意义。多因素分析结果表明ARDS和高血糖是PE发生的高危因素。非PE组的治愈率高于PE组。
结论: PE的发生是多因素作用的结果,ARDS、高血糖的发生可能是其高危因素。

目的: 应用寡核苷酸基因芯片技术,研究血瘀证患者差异基因表达谱。
方法: 16例血瘀证患者经冠状动脉造影诊断后,分为冠心病血瘀证组和非冠心病血瘀证组,每组8例;并选年龄和性别相匹配的8名健康人为健康对照组。抽取静脉血,分离白细胞,抽提RNA,质控芯片（Test3芯片）对样本质量进行检测,然后与Affymetrix U133 Plus 2.0芯片进行杂交,通过扫描和软件分析,比较冠心病血瘀证组、非冠心病血瘀证组与健康对照组的基因表达谱,筛选血瘀证相关差异基因,并进一步进行基因本体（Gene Ontology, GO）和通路分析,使用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应法对目标基因进行验证。
结果: 通过差异基因筛选,与血瘀证相关的差异基因共有48个,其中上调基因26个,下调基因22个;通过GO分析,其中与炎症免疫相关的基因有5个,占10.4%;通路分析结果显示,有意义的10条通路中有5个涉及炎症和免疫反应。经实时荧光定量逆转录聚合酶链反应验证了基因芯片准确可靠。
结论: 血瘀证基因表达谱研究显示了炎症和免疫相关基因的比例和显著性优势,说明炎症和免疫反应在一定程度上介导了血瘀证的发生发展。

目的: 观察补肾化瘀祛痰方（Bushen Huayu Qutan Recipe, BHQR）对雄激素致不孕大鼠（androgen-sterilized rat, ASR）卵巢局部调控因子的影响。
方法: 选择9日龄幼年SD雌性大鼠105只,随机分为病理模型组（90只）和溶媒对照组（15只）,丙酸睾丸酮诱导形成ASR。造模成功的30只大鼠随机分为中药干预组和模型对照组。中药干预组用BHQR灌胃干预,模型对照组及溶媒对照组给予蒸馏水灌胃处理,疗程30 d。疗程结束后观察大鼠性周期情况,用放射免疫方法检测血睾酮和胰岛素（insulin, INS）含量,用免疫组织化学方法检测卵巢组织抑制素（inhibin, INH）、胰岛素样生长因子-Ⅰ(insulin-like growth factor-Ⅰ, IGF-Ⅰ)和血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor, VEGF）的表达。
结果: BHQR不仅能明显降低大鼠血INS水平（P<0.05）,还能显著降低INH、IGF-Ⅰ和VEGF在卵巢局部的表达（P<0.01）。大鼠排卵恢复率为66.67％。
结论: BHQR可能通过改善胰岛素抵抗,降低INH、IGF-Ⅰ及VEGF水平,改善卵巢内部环境,多途径、多靶点促使卵巢功能恢复,促进卵泡生长发育,诱发排卵。

目的: 观察调中颗粒对混合反流性食管炎大鼠食管黏膜病理改变及血清氧自由基的影响,探讨调中颗粒治疗反流性食管炎的作用机制。
方法: 58只SD大鼠随机分成5组：调中颗粒组、半夏泻心汤组、西沙必利组、模型组和假手术组。通过食管十二指肠端侧吻合术法复制混合反流性食管炎大鼠模型,造模结束后灌胃给药,连续给药12 d后处死大鼠,HE染色法观察病理变化,免疫组织化学SABC法检测大鼠食管黏膜中肿瘤抑制蛋白质p53和增殖细胞核抗原（proliferating cell nuclear antigen, PCNA）的表达,比色法检测血清中丙二醛（malondialdehyde, MDA）含量,超氧化物歧化酶（superoxide dismutase, SOD）和谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase, GSH-Px）的活性。
结果: 治疗结束后,与模型组比较,调中颗粒组、半夏泻心汤组和西沙必利组大鼠食管黏膜组织病理改变有不同程度的修复。与模型组比较各治疗组血清MDA含量下降（P<0.05, P<0.01）,SOD和GSH-Px活性升高（P<0.05, P<0.01）,p53和PCNA表达减少（P<0.01）。调中颗粒在降低MDA含量、提高SOD和GSH-Px活性方面优于西沙必利片（P<0.05）,减少PCNA和p53表达方面优于半夏泻心汤和西沙必利片（P<0.05）。
结论: 调中颗粒可以降低MDA的含量,提高SOD和GSH-Px的活性,减少PCNA和p53的表达,促进黏膜的修复,可能为其治疗反流性食管炎的作用机制。

目的: 观察阳和汤对兔骨关节炎软骨细胞中血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor, VEGF）表达的影响。
方法: 新西兰大白兔15只随机分为正常组、模型组和阳和汤组。按照Hulth法建立膝骨关节炎模型,术后第5周起至第7周末,阳和汤组予混有阳和汤的颗粒饲料,正常组及模型组均给予普通饲料;术后第8周分别取各组胫骨平台关节软骨,采用番红O染色,进行Mankin评分;免疫组织化学染色测定关节软骨中VEGF表达的阳性指数。
结果: 正常对照组番红O染色的Mankin评分与模型组比较,差异有统计学意义（P<0.01）。阳和汤组番红O染色减少或缺失程度较模型组轻,差异有统计学意义（P<0.01）。各组关节软骨切片VEGF免疫组化染色分析,模型组VEGF的阳性指数明显高于正常组,差异有统计学意义（P<0.01）,阳和汤组VEGF阳性指数明显低于模型组,差异有统计学意义（P<0.05）。
结论: VEGF在骨关节炎形成早期起重要作用;阳和汤可延缓关节软骨退行性改变,其作用可能是通过调控VEGF而达到抑制血管增生的作用。

目的: 探讨寒性药玄参和热性药附子对大、小鼠心肌肥厚及神经内分泌因子的影响。
方法: 采用注射异丙肾上腺素及L-甲状腺素两种方法分别制备小鼠和大鼠心肌肥厚模型。随机分为5组：正常组、模型组、美托洛尔组（或卡托普利组）、玄参组和附子组。灌胃给药干预7~9 d,称体质量后取血和心脏备用。称心脏质量测定左心室及全心质量指数;放射免疫法测定血浆环磷酸腺苷（cyclic adenosine monophosphate,cAMP）和心肌组织血管紧张素Ⅱ（angiotensinⅡ, AngⅡ）的水平;病理切片HE染色观察心肌细胞横断面面积大小。
结果: 寒性药玄参能显著改善心脏质量指数,降低cAMP、AngⅡ的含量,明显缩小心肌细胞横断面面积。而热性药附子则无此作用。
结论: 寒性药玄参能通过抑制心肌肥厚大鼠交感神经系统活性,降低AngⅡ水平而抑制心肌肥厚。而热性药附子抗心肌肥厚及抑制神经内分泌因子分泌的作用不显著。

目的: 观察血府逐瘀胶囊对急性心肌梗死（acute myocardial infarction, AMI）再灌注后心肌组织及一氧化氮（nitric oxide, NO）/一氧化氮合酶（nitric oxide synthase, NOS）体系和内皮素-1（endothelin-1, ET-1）的影响,探讨其改善血管内皮功能的机制。
方法: Yorkshire猪45只,随机分成假手术组、模型对照组和血府逐瘀胶囊治疗组。开胸结扎左冠状动脉前降支90 min后,松解2 h制备AMI再灌注模型。测定造模前后和再灌注后血清ET-1和NO的含量;冠状动脉造影观察心肌血流恢复情况;Western blot分析心肌组织内皮型一氧化氮合酶（endothelial nitric oxide synthase, eNOS）和ET-1蛋白表达;病理学分析心肌组织形态变化。
结果: 血府逐瘀胶囊组造模后和再灌注后血ET-1水平低于模型组（P<0.01）,而NO表达水平明显高于模型组（P<0.01）。冠状动脉造影提示治疗组冠状动脉血流通畅情况优于对照组,但结果没有统计学意义（P=0.253）。Western blot显示血府逐瘀胶囊组eNOS蛋白表达较模型组有所提高,ET-1蛋白表达则有所下降（P<0.01）。HE染色及微血管密度分析显示与模型对照组相比,血府逐瘀胶囊组毛细血管扩张程度明显减轻,心肌组织损伤明显改善,微血管密度明显增加。
结论: 内皮细胞受损可能是无再流现象发生的重要机制之一,血府逐瘀胶囊可能通过调控NO和ET-1基因表达来达到对AMI的治疗作用。

目的: 通过分析左心室心肌原癌基因c-fos和c-myc mRNA及蛋白的表达,探讨活血潜阳方改善自发性高血压大鼠（spontaneous hypertensive rat, SHR）左心室肥厚的作用机制。
方法: 以10周龄的SHR为高血压左心室肥厚模型,随机分为SHR模型组,中药大、中、小剂量治疗组,西拉普利治疗组,年龄和性别相匹配的京都（Wistar-Kyoto, WKY）大鼠作为正常对照组,每组5只。灌胃14周后,取大鼠心脏组织,用原位杂交组织化学法和免疫组化法分别检测心肌c-fos和c-myc mRNA及蛋白的表达。
结果: 24周龄模型组SHR左心室肥厚心肌的原癌基因c-fos和c-myc mRNA及蛋白的表达与WKY大鼠比较明显增强（P<0.01）。与SHR模型组比较,大、中和小剂量活血潜阳方组大鼠左心室心肌组织中c-fos和c-myc mRNA的表达下降（P<0.05）;大、中剂量活血潜阳方可降低c-myc蛋白的表达,但对c-fos蛋白表达的影响与模型组比较,差异未见统计学意义。
结论: 活血潜阳方可以下调SHR心肌组织中原癌基因c-myc的表达,可能是改善高血压左心室肥厚的重要机制之一,是否通过对c-fos表达的影响治疗左心室肥厚尚不能确定。

目的: 研究独活中6种香豆素类成分（伞形花内酯、甲氧基欧芹素、二氢欧山芹素、二氢欧山芹醇乙酯、当归醇-A和当归醇-B）在人源结肠腺癌细胞系Caco-2细胞单层模型的吸收和转运。
方法: 采用Caco-2细胞单层模型研究6种香豆素类化合物由绒毛面（AP侧）到基底面（BL侧）和从BL侧到AP侧两个方向的转运过程,采用高效液相色谱法测定其在AP和BL侧的含量,计算表观渗透系数（apparent permeability coefficient, P_app）,并与阳性对照药普萘洛尔和阿替洛尔进行比较。采用ATP耗竭剂碘乙酰胺和MRP2抑制剂MK571添加法探讨当归醇-B的转运机制。
结果: 6种香豆素类成分皆以被动扩散为主要方式被Caco-2细胞吸收、转运。伞形花内酯、甲氧基欧芹素、二氢欧山芹素、二氢欧山芹醇乙酯、当归醇-A和当归醇-B由AP侧到BL侧的P_app分别为（2.679±0.263）× 10 ^-5、（1.306±0.324）×10 ^-5、（0.595±0.086）×10 ^-6、（0.293±0.041）×10 ^-6、（1.532±0.444）× 10 ^-5和（1.413±0.243）×10 ^-5 cm/s;由BL侧到AP侧的P_app分别为（3.381±0.410）×10 ^-5、（0.898±0.134） × 10 ^-5、（0.510±0.183）×10 ^-6、（0.222±0.025）×10 ^-6、（1.203±0.280）×10 ^-5和（0.754±0.092）×10 ^-5 cm/s。在本实验条件下,易吸收的阳性对照药普萘洛尔由AP侧到BL侧的P_app值为2.18×10 ^-5 cm/s,不易吸收的阳性对照药阿替洛尔由AP侧到BL侧的P_app值为2.77×10 ^-7 cm/s。上述6个香豆素类化合物中,伞形花内酯、甲氧基欧芹素、当归醇-A和当归醇-B的P_app值与普萘洛尔的P_app值在一个数量级;二氢欧山芹素和二氢欧山芹醇乙酯的P_app值在易吸收和不易吸收的阳性对照药之间。以EBSS代替HBSS作为转运介质,在碘乙酰胺和MK571存在下,当归醇-B从AP侧到BL侧和从BL侧到AP侧转运的P_app值与HBSS为转运介质的对照组相比皆没有统计学意义上的变化。回收率实验中,伞形花内酯的平均总回收率为（83.31±3.52）%、当归醇-A的平均总回收率为（77.39±7.38）%;甲氧基欧芹素、二氢欧山芹素和当归醇-B的平均总回收率在50%~65%之间,二氢欧山芹醇乙酯的平均总回收率低于10%。甲氧基欧芹素和二氢欧山芹素在Caco-2细胞中的蓄积率分别为（36.15±5.87）%和（53.90±4.39）%。
结论: 6种香豆素皆以被动扩散为主要方式被Caco-2细胞单层吸收和转运;伞形花内酯、甲氧基欧芹素、当归醇-A和当归醇-B是良好吸收的化合物,二氢欧山芹素和二氢欧山芹醇乙酯的吸收性属中等。在Caco-2细胞中,甲氧基欧芹素和二氢欧山芹素有蓄积,二氢欧山芹醇乙酯具有代谢不稳定性。当归醇-B的转运不受转运介质EBSS（pH 6.5）的影响,碘乙酰胺或MK571的存在亦不影响当归醇-B在两个方向的转运。

目的: 观察黄芪对basal-like乳腺癌细胞MDA-MB-468和小鼠骨髓基质干细胞（murine bone marrow stromal stem cells, mMSCs）增殖的影响及其异同。
方法: 用不同浓度的黄芪注射液（Astragalus injection, AI）分别干预MDA-MB-468和mMSCs,不加AI培养2 d的MDA-MB-468细胞作为空白对照。用相差倒置显微镜观察细胞形态,透射电子显微镜观察细胞超微结构。运用细胞计数试剂盒（cell counting kit-8, CCK-8）检测AI对MDA-MB-468的细胞毒性作用。流式细胞术检测AI对细胞周期和细胞凋亡的影响。酶比色法监测 MDA-MB-468细胞培养上清乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase, LDH）含量。免疫细胞化学法检测AI对MDA-MB-468表皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor, EGFR）和p53蛋白表达的影响。
结果: 1 g/ml AI对MDA-MB-468的增殖有明显的抑制作用,且具有时效关系。1 g/ml AI对mMSCs的增殖有明显的抑制作用,但其抑制作用不及顺铂,而0.1 g/ml AI对mMSCs的增殖有明显的促进作用。不同浓度的AI能诱导MDA-MB-468细胞凋亡。不同浓度AI组和顺铂组MDA-MB-468细胞培养上清LDH水平,与空白对照组相比,差异均无统计学意义。AI能显著下调EGFR和p53蛋白的表达。
结论: AI对MDA-MB-468和mMSCs增殖的影响与药物浓度有关,其抑制MDA-MB-468增殖和诱导凋亡的机制可能通过下调EGFR和p53蛋白的表达而实现。

目的: 探讨养肝利胆颗粒对豚鼠胆囊胆固醇结石成石率和血浆胆囊收缩素含量的影响。
方法: 80只豚鼠随机分为正常组、模型组、养肝利胆颗粒组和熊去氧胆酸（ursodeoxycholic acid, UDCA）组。除正常组外,采用高胆固醇致石食饵诱发法建立豚鼠胆结石动物模型,并于造模当天开始灌胃治疗,养肝利胆颗粒组予养肝利胆颗粒1.81 g/(kg·d),UDCA组予UDCA 30.12 mg /(kg·d),模型组和正常对照组灌胃等容量的生理盐水,连续7周。疗程结束后观察各组豚鼠一般情况变化和胆囊成石率,并用放射免疫法检测血浆胆囊收缩素（cholecystokinin, CCK）的含量。
结果: 养肝利胆颗粒能明显改善胆结石豚鼠的一般情况及行为学体征,但不能恢复到正常水平。模型组豚鼠成石率（82.35％）明显高于正常对照组（5.26％）（P<0.01),养肝利胆颗粒组和UDCA组豚鼠成石率分别为27.78%和38.89%,均明显低于模型组（P<0.05）。模型组血浆CCK含量较正常对照组明显降低（P<0.01）,养肝利胆颗粒组和UDCA组血浆CCK含量虽低于正常对照组,但均高于模型组,差异有统计学意义（P<0.01）。养肝利胆颗粒组和UDCA组血浆CCK含量比较差异无统计学意义（P>0.05）。
结论: 养肝利胆颗粒能显著降低豚鼠胆结石的成石率, 其作用机制可能与养肝利胆颗粒能提高豚鼠血浆CCK含量有关。

目的: 建立中华小型猪心肌缺血血瘀证的模型。
方法: 在小型猪左冠状动脉前降支第一间隔支起始部远端放置Ameroid缩窄环,使Ameroid缩窄环内层缓慢膨胀压迫冠状动脉,造成慢性心肌缺血模型。术后,对动物的行为改变、一般情况及血液流变学指标等进行动态观察。
结果: 手术后4周冠状动脉造影显示心肌缺血小型猪冠状动脉狭窄率大于75％,其行为及一般情况、舌象和血液流变学指标等与术前和同期假手术组相比,差异有统计学意义（P<0.05）。
结论: 术后4周,该模型之证候属于中医血瘀证范畴,而且其发病过程与人类慢性心肌缺血的病理过程相似,适用于心肌缺血血瘀证的研究。