辩证唯物主义认为,概念是随着人类认识深度和广度的增加而逐渐发展的。证候概念的发展亦是如此。隋唐时期,明确了证候概念的内涵,形成了除六经以外的脏腑辨证纲领的雏形。宋金元时期证候内涵的发展,体现在各派医家根据自己的临证经验体悟,在实践基础上进行的理论探索与完善。明清时期,通过建立八纲辨证实现对辨证方法的规范和完善。当代,对于证候概念的发挥,表现为采用现代科学技术手段,从不同层次、不同方面对疾病及其证候进行的客观化研究。

非中医学人士往往根据传统中医理论中“肝生于左”的记载,认为中医学的人体解剖观不正确。我们认为,传统中医理论中的脏腑指的是某一种特定的功能系统,而并非现代医学所谓的只是一种实体解剖器官。因此,传统中医学与现代医学对于脏器的概念不是完全相同的。通过研究《黄帝内经》,我们发现“肝生于左”实际上是指肝在中国传统文化卦象中的相对位置,而非人体脏腑的解剖学或形态学位置。脏腑的本义是指实体解剖器官,其解剖位置与现代医学的认识基本一致,其功能也与现代医学的认识有某种相同之处。

目的 研究冠心病痰瘀证候与临床四诊信息的相互关系,为其分类及规范化诊断提供参考。方法 采用匹配矩阵、因子分析和聚类分析法,对200例冠心病患者痰证、瘀证、痰瘀互阻证及非痰非瘀证46项临床症状进行相关性分析。结果 冠心病不同痰瘀证候舌、脉象与非痰非瘀证之间存在明显差异;中医病机脏腑定位于心和肾,以心气虚为主,兼肾气虚,痰证患者尚多伴脾气虚;在46项临床症状中,仅15项症状在痰证、瘀证和痰瘀互阻证中相伴出现频率较高。除共有的本虚证外,痰证的主要临床症状为白腻苔和滑脉,尚见胸脘痞满和腹胀等;瘀证则以紫舌、舌生瘀斑为主,尚见痛有定处;痰瘀互阻证则兼上述两种证候的主要症状。结论 综合应用匹配矩阵、因子分析和聚类分析法,可以获得有关冠心病不同痰瘀证候主要临床特征及脏腑定位的信息,对冠心病不同痰瘀证候辨证及其分类研究具有一定的意义。

目的 观察健脾化湿通络法治疗类风湿关节炎（rheumatoid arthritis, RA）贫血患者的临床疗效并探讨其作用机制。方法 40例类风湿关节炎贫血患者随机分为3组：新风胶囊治疗组20例（口服新风胶囊）、雷公藤治疗组10例（口服雷公藤多苷片）和甲氨蝶呤治疗组10例（口服甲氨蝶呤片）。3组均连续服药3个月。观察各组患者的临床疗效。比较治疗前后各组患者全身和关节症状、贫血、血清铁、C反应蛋白、类风湿因子、免疫球蛋白、白细胞介素10、肿瘤坏死因子α及红细胞生成素（erythropoietin, EPO)的变化,以及不良反应。结果 新风胶囊治疗组在治疗总有效率、改善类风湿关节炎贫血患者关节症状及部分实验室检查指标（血沉、类风湿因子、C反应蛋白、免疫球蛋白）方面,与甲氨蝶呤治疗组和雷公藤治疗组相似;但在改善类风湿关节炎贫血患者全身症状、血红细胞计数、血红蛋白含量以及上调白细胞介素10、下调肿瘤坏死因子α、升高血清铁及调节血清EPO水平方面均优于甲氨蝶呤治疗组和雷公藤治疗组。结论 依据从“脾”论治原则研制的具有健脾化湿通络功效的中药新风胶囊,能明显改善类风湿关节炎贫血患者的全身及贫血症状、缓解患者的关节症状,其机制与调整细胞因子平衡、调节血清EPO的水平及升高血清铁含量相关。

目的 观察软坚消瘿汤治疗慢性淋巴细胞性甲状腺炎的临床疗效。方法80例慢性淋巴细胞性甲状腺炎患者随机分为软坚消瘿汤治疗组和西药治疗组,每组40例。治疗16周后,检测两组患者甲状腺功能及血清抗甲状腺自身抗体滴度水平,并进行临床疗效评价。结果 软坚消瘿汤治疗组总有效率92.5%,西药治疗组总有效率60.0%,两组比较差异有统计学意义。两组患者经治疗后,血清游离三碘甲状腺原氨酸、游离甲状腺素水平均较治疗前明显升高,差异有统计学意义;而血清促甲状腺素水平、血清抗甲状腺球蛋白抗体及抗甲状腺微粒体抗体滴度水平则均较治疗前明显下降,差异有统计学意义。结论软坚消瘿汤具有较好的软化、缩小肿大甲状腺及其结节的作用,可以提高机体的免疫功能、减轻甲状腺的自身免疫反应、促进甲状腺细胞功能的恢复。

目的 探讨桂枝汤、柴胡桂枝汤、小柴胡汤和卡莫司他对大鼠自发性慢性胰腺炎的干预作用及其方证病态基础。方法 57只雄性4周龄WBN/Kob大鼠随机分为5组：模型组、桂枝汤组、柴胡桂枝汤组、小柴胡汤组和卡莫司他组,每组大鼠均予以相应药物干预,共12周。每4周取大鼠胰腺组织观察胰腺湿重;HE染色观察胰腺组织病理学改变;RT-PCR技术检测大鼠胰腺胰腺炎相关蛋白（pancreatitis-associated protein, PAP）mRNA的表达水平;免疫组织化学方法检测胰腺PAP蛋白的表达。结果 模型组自12周龄起胰腺组织发生胰腺炎病理学改变;桂枝汤组未观察到胰腺炎病理学改变;小柴胡汤组和卡莫司他组在16周龄时,胰腺组织均发生明显的胰腺炎病理学改变。桂枝汤组抑制PAP mRNA表达的作用大于其他各中药干预组。桂枝汤组和柴胡桂枝汤组在12周龄时,未发现胰腺PAP的表达。结论 桂枝汤、柴胡桂枝汤、小柴胡汤和卡莫司他对大鼠自发性慢性胰腺炎具有不同程度的防治作用,其中以桂枝汤的作用最为明显。“太阳表证”可能是大鼠自发性慢性胰腺炎的中医基本证候病机,PAP的表达可能是其证候病机的病态基础之一。

目的：探讨美替拉酮阻断下丘脑-垂体-肾上腺皮质轴(hypothalamic-pituitary-adrenal cortex axis, HPAA)对慢性心理应激小鼠免疫器官和细胞免疫功能有无保护作用,以及加味逍遥丸调节慢性心理应激损伤的作用是否与下丘脑-垂体-肾上腺皮质轴相关。方法： 将小鼠随机分为生理盐水对照组、加味逍遥丸对照组、美替拉酮对照组、美替拉酮合用加味逍遥丸对照组、生理盐水应激组、加味逍遥丸应激组、美替拉酮应激组、美替拉酮合用加味逍遥丸应激组。其中对照组小鼠不予以应激刺激,应激组小鼠采用电刺激条件反射箱诱导建立慢性心理应激模型。检测各组小鼠体质量、血清糖皮质激素水平、胸腺指数、胸腺细胞凋亡率、脾脏自然杀伤细胞活性及淋巴细胞转化率,并观察小鼠胸腺组织病理学改变。结果： 各应激组与其相对应的非应激对照组比较,其胸腺指数明显下降,自然杀伤细胞活性及淋巴细胞转化率均明显下降;同时,胸腺细胞凋亡率升高,胸腺组织病理损伤加重。美替拉酮及加味逍遥丸应激组与生理盐水应激组比较,其血清糖皮质激素含量明显下降,自然杀伤细胞活性及脂多糖刺激的淋巴细胞转化率明显升高,胸腺组织病理损伤减轻。美替拉酮合用加味逍遥丸应激组与单纯的美替拉酮或加味逍遥丸应激组各项指标比较,均无明显差异。结论： 阻断HPAA对慢性心理应激小鼠的免疫系统有明显的保护作用。加味逍遥丸对慢性心理应激小鼠的保护作用与美替拉酮阻断HPAA的效应基本一致,两者无叠加、协同效应。推测HPAA是加味逍遥丸抗应激损伤的作用靶点之一。

目的 探讨预先服用灵芝孢子能否降低维甲酸诱导的胚胎神经管畸形的发生率。方法 将胚胎（embryo, E）0 d孕鼠随机分为正常对照组、溶剂组、模型组和灵芝孢子组,每组5只。灵芝孢子组孕鼠于E0 d起即给予胃饲灵芝孢子溶液,溶剂组孕鼠胃饲等量溶剂。至E7.75 d时,模型组和灵芝孢子组孕鼠一次性胃饲全反式维甲酸。E10.5 d时取孕鼠胚胎,计算神经管畸形发生率及测量胚胎顶臀距。采用免疫荧光组织化学染色和流式细胞术检测胚胎神经管神经上皮细胞巢蛋白的表达及细胞周期分布,采用DNA定量荧光染色及RT-PCR技术检测胚胎神经管细胞周期素依赖性蛋白激酶2（cyclin-dependent kinase 2, Cdk2）和Cdk4 mRNA的转录水平。结果 孕鼠胚胎神经管畸形发生率模型组为79.41％,灵芝孢子组为21.67％;顶臀距模型组为(3.62±1.27) mm,灵芝孢子组为(5.84±0.92) mm。胚胎神经管神经上皮细胞巢蛋白表达阳性率模型组为32.44％,灵芝孢子组为77.65％。模型组孕鼠胚胎神经管神经上皮细胞G0/G1期比例为82.80％,灵芝孢子组为53.74％。灵芝孢子组Cdk4 mRNA转录水平高于正常对照组和溶剂组,但未检测到Cdk2 mRNA。结论 预先服用灵芝孢子能够降低维甲酸诱导的孕鼠胚胎神经管畸形的发生率。

目的 探讨电针对老年性痴呆（Alzheimer’s disease, AD）大鼠胆碱能神经元损伤的保护作用及其作用机制。方法 36只SD老龄大鼠随机分为正常对照组、假手术组、模型组和电针治疗组, 采用穹隆-海马伞损伤法制作大鼠AD模型。电针治疗组施以电针百会、涌泉、太溪、血海等穴。采用放射免疫法检测脑中隔区胆碱乙酰转移酶（choline acetyltransferase, ChAT）活性,免疫组化法检测海马CA3区神经生长因子（nerve growth factor, NGF）和c-fos蛋白的表达。结果 电针治疗组ChAT活性高于模型组;电针治疗组NGF和c-fos蛋白的表达较模型组增加。结论 电针对AD模型大鼠胆碱能神经元损伤的保护作用可能与促进c-fos合成及诱导海马NGF的表达相关。

目的 探讨去甲斑蝥素-海藻酸/聚酸酐微球（norcantharidin-alginic acid/poly acid anhydride microspheres, N-MS）介入治疗大鼠肝癌的作用及其机制。方法 采用乳化-化学交联法制备N-MS。建立大鼠肝癌模型,将荷瘤大鼠随机分为空白对照组、去甲斑蝥素（norcantharidin, NCTD）组、空白微球（blank microsphere, B-MS）组、NCTD-碘油组和N-MS组。各组荷瘤大鼠分别经肝动脉注入生理盐水、NCTD、B-MS、NCTD-碘油和N-MS。治疗后,观察各组大鼠生存时间、肝肿瘤体积和肝肿瘤坏死程度;采用TUNEL法检测各组大鼠肝肿瘤细胞凋亡指数;采用免疫组织化学链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连接法（streptavidin-biotin peroxidase method, SP）检测各组大鼠肝肿瘤细胞Ki-67的表达。结果 治疗后,N-MS组大鼠的生存期较其他各组明显延长;肝肿瘤体积小于其他各组;肿瘤生长率和肝肿瘤细胞Ki-67的表达明显低于其他各组;肿瘤坏死程度和肝肿瘤细胞凋亡指数均高于其他各组,差异均有统计学意义。结论 N-MS经肝动脉介入对大鼠肝癌具有较好的治疗作用,其作用机制与栓塞肿瘤微血管、缓慢释放NCTD、诱导肿瘤细胞凋亡和下调Ki-67的表达,从而抑制肿瘤细胞增殖有关。

目的 探讨山柰挥发油对裸鼠原位移植人胃癌MKN-45细胞增殖的抑制作用。方法 建立裸鼠原位移植人胃癌MKN-45细胞模型。105只裸鼠随机分为山柰挥发油乳剂高、中、低剂量组,乳剂溶媒对照组,生理盐水组, 环磷酰胺（cyclophosphamide, CTX)组和空白对照组,每组15只。各组裸鼠予以相应药物实施干预。观察各组荷瘤裸鼠一般情况、肿瘤生长情况及抑瘤率。流式细胞仪检测肿瘤细胞周期分布及细胞凋亡情况。电镜下观察肿瘤细胞超微结构的变化。结果 山柰挥发油乳剂高、中、低剂量组的抑瘤率分别为57.2％、28.0％和5.0％,肿瘤细胞主要被阻滞于G0/G1期,与空白对照组比较差异有统计学意义,且呈剂量依赖效应。电镜下观察山柰挥发油乳剂高剂量组和CTX组可见较多凋亡细胞,而山柰挥发油乳剂中、低剂量组凋亡细胞较少。结论 山柰挥发油对裸鼠原位移植人胃癌MKN-45细胞具有较好的抑制增殖作用,且呈剂量依赖效应,其机制可能与调节胃癌细胞周期、促进G1期阻滞及诱导细胞凋亡相关。

目的 观察苦参碱对体外人肾癌细胞系GRC-1细胞株增殖及细胞凋亡的影响,探讨苦参碱诱导GRC-1细胞株凋亡的作用机制。方法 应用不同浓度的苦参碱分别作用于人肾癌细胞系GRC-1细胞株24、48、72、96 h。采用MTT法观察苦参碱对GRC-1细胞株的细胞毒作用;透射电镜和流式细胞术观察、检测苦参碱诱导的细胞凋亡;免疫细胞化学技术检测苦参碱对GRC-1细胞株Bcl-2、Bax蛋白表达的影响。结果 不同浓度的苦参碱对GRC-1细胞株均有一定的增殖抑制作用,且呈量效和时效关系。苦参碱能明显诱导GRC-1细胞株凋亡。经苦参碱作用后,GRC-1细胞株Bcl-2蛋白表达明显减弱而Bax蛋白表达明显增强。结论 苦参碱对体外人肾癌细胞系GRC-1 细胞株有一定的增殖抑制作用,其机制可能与调节Bcl-2/Bax蛋白表达比值以诱导细胞凋亡相关。

目的 观察β-榄香烯对兔VX2肾移植癌的放射增敏作用。方法 建立兔VX2肾移植癌模型。将动物随机分为空白对照组、放疗组和放射增敏组（放射治疗结合β-榄香烯乳剂肾动脉灌注治疗）。予以各组相应干预措施后,采用螺旋CT及B超动态监测肿瘤体积的变化,比较各组肿瘤生长延缓时间,计算β-榄香烯乳剂的放射增敏比（sensitization enhancement ratio, SER）。同时,观察各组肿瘤组织的病理学改变。采用TdT介导的带生物素dUTP缺口末端标记法检测各组肿瘤细胞凋亡指数。结果 采用6 Mev X线放射治疗（3 Gy·Fx ^–1·d ^–1×5 d）结合β-榄香烯乳剂肾动脉灌注治疗（10 mg·kg ^–1·d ^–1×5 d）的放射增敏组,其肿瘤的放射增敏效应最为显著。放射增敏组肿瘤生长延缓时间明显长于放疗组和空白对照组。β-榄香烯乳剂SER为1.89。透射电镜下放射增敏组肿瘤细胞凋亡较放疗组和空白对照组显著。放射增敏组肿瘤细胞凋亡指数明显高于放疗组和空白对照组。 结论 低剂量β-榄香烯乳剂对兔VX2肾移植癌具有放射增敏作用,可诱导肿瘤细胞凋亡。

目的 观察温肾中药对雌二醇和孕酮所致的原代培养正常人乳腺上皮细胞增殖的影响。方法 采用消化法进行正常人乳腺上皮细胞分离及原代培养。在相差倒置显微镜和透射电镜下对细胞进行形态学鉴定。应用雌二醇和孕酮干预以促使正常人乳腺上皮细胞增殖,给予不同浓度温肾中药及他莫昔芬进行药物干预。采用MTT法检测不同浓度、不同药物干预下乳腺上皮细胞的增殖情况。结果 原代培养正常人乳腺上皮细胞经形态学鉴定符合正常人乳腺上皮细胞的形态学特征。浓度均为1×10–5 g/L的雌二醇和孕酮混合培养液可以明显促进正常人乳腺上皮细胞增殖。高浓度温肾中药能明显促进原代培养正常人乳腺上皮细胞增殖,而低浓度温肾中药则可抑制其增殖。他莫昔芬对原代培养正常人乳腺上皮细胞增殖无明显影响。结论 雌二醇和孕酮可以促进正常人乳腺上皮细胞增殖。温肾中药调节正常人乳腺上皮细胞增殖的作用与药物浓度相关。

目的 观察大鼠肺纤维化形成过程中基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinase, MMP）-2/9的活性及其活性抑制物——基质金属蛋白酶组织抑制因子（tissue inhibitor of matrix metalloproteinase, TIMP）-1/2蛋白表达的动态变化,探讨肺纤维化形成过程中细胞外基质（extracellular matrix, ECM）降解的调控规律。方法 SD大鼠48只,随机分为模型组（30只）与正常对照组（18只）。模型组大鼠予以1次性气管内注射博来霉素诱导肺纤维化模型,正常对照组大鼠于气管内注入等量生理盐水。每组再各设1 d、3 d和1、2、3、4 周共6个时间观察点,动态观察大鼠肺系数的变化。HE染色观察大鼠肺组织病理学的改变;Masson染色观察大鼠肺组织胶原沉积情况;Jamall氏法测定肺组织羟脯氨酸（hydroxyproline, Hyp）的含量;Western印迹法分析肺组织MMP-2、MMP-9、TIMP-1和TIMP-2蛋白的表达变化;明胶酶图法检测肺组织MMP-2与MMP-9的活性。结果 与正常对照组大鼠比较,模型组大鼠染毒后2周其肺组织发生局灶性病变,肺泡壁与间隔增厚,肺泡腔与间质内有大量炎细胞浸润,伴有少量成纤维细胞;肺系数明显增高;肺组织内Hyp含量稍升高;MMP-2 /9蛋白的表达与活性增加,以活化型MMP-2增加更为明显;TIMP-1/2蛋白的表达则逐渐增加。模型组大鼠染毒后3~4周时,肺泡结构遭到破坏,部分肺泡腔塌陷消失,由胶原纤维和成纤维细胞占据,肺泡壁与间隔进一步增厚,形成严重的肺纤维化;肺系数较2周时有所下降,肺组织Hyp含量和TIMP-1/2蛋白的表达明显增加,至染毒后4周时最为明显;MMP-2/9活性较2周时有所下降,尤以活化型MMP-2的活性下降较为明显。结论 博来霉素诱导肺纤维化形成过程中,早期肺组织的病理学变化以肺泡炎症为主,肺组织内MMP-2/9活性增高;后期以纤维化为主,肺组织TIMP-1/2表达明显增加,MMP-2/9活性则有所下降。

目的 观察健脾清化方对慢性肾功能衰竭高脂血症大鼠肾组织氧自由基和转化生长因子β1（transforming growth factor β1, TGFβ1）mRNA表达的影响。方法 模型组和健脾清化方治疗组大鼠予以高脂饲料喂养结合5/6肾切除法,建立慢性肾功能衰竭高脂血症大鼠模型,并分别予以蒸馏水和健脾清化方灌胃干预8周。干预结束后,检测正常对照组、模型组和健脾清化方治疗组大鼠24 h尿蛋白定量及血尿素氮、肌酐、胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白和低密度脂蛋白的水平;并检测各组大鼠肾组织超氧化物歧化酶的活性及丙二醛和游离脂肪酸的含量。采用RT-PCR技术检测各组大鼠肾组织TGFβ1 mRNA的表达水平。结果 模型组大鼠24 h尿蛋白定量及血尿素氮、肌酐、胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白和低密度脂蛋白水平均较正常对照组明显升高;肾组织超氧化物歧化酶活性较正常对照组明显下降;肾组织丙二醛、游离脂肪酸含量及TGFβ1 mRNA表达水平则较正常组对照组明显升高,差异均有统计学意义。健脾清化方治疗组上述指标则均较模型组有不同程度的改善,差异有统计学意义。结论 健脾清化方可减少慢性肾功能衰竭高脂血症大鼠24 h尿蛋白定量,改善其肾功能,其作用机制与改善脂质代谢紊乱、调节氧化-抗氧化系统及降低肾组织TGFβ1的表达相关。

目的 观察甘草甜素对大鼠阿霉素肾病肾组织层黏连蛋白（laminin, LN）的表达及尿蛋白排泄的影响,探讨甘草甜素对大鼠阿霉素肾病的发生、发展是否具有保护作用。方法 18只SD雄性大鼠随机分为3组：正常对照组、模型组、甘草甜素治疗组。模型组和甘草甜素治疗组大鼠采用尾静脉注射阿霉素的方法建立阿霉素肾病模型。甘草甜素治疗组予以甘草甜素灌胃8周,正常对照组和模型组大鼠予以等量生理盐水灌胃。检测各组大鼠24 h尿蛋白定量及血清肾功能指标。观察各组大鼠肾组织病理学改变。采用免疫组织化学方法检测肾组织LN的表达水平。结果 甘草甜素治疗组于用药第4、8周24 h尿蛋白定量与同期模型组相比,均有明显改善,差异有统计学意义。甘草甜素治疗组大鼠肾组织病理学改变亦较模型组明显减轻,且肾组织LN的表达亦明显下降,差异有统计学意义。结论 甘草甜素对大鼠阿霉素肾病具有一定的保护作用,可以减少尿蛋白的排泄、改善肾功能及减轻肾小球硬化的病理学改变。甘草甜素延缓肾小球硬化的进程,可能与降低肾组织LN的表达从而抑制细胞外基质的积聚相关。